耐酸模块

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华南理工林章凛等:耐酸高产赖氨酸大肠杆菌构建
合成生物学与绿色生物制造· 2025-07-11 15:57
SynBio团队 | 华南理工 林章凛教授 机制概述:酸响应模块由两个质粒构成,一个质粒带有酸响应启动子(酸触发模块),表达4个针对不同立足点开关的触发RNA,另一个质粒带有4种立足 点开关(耐酸模块),分别表达4个与耐酸有关的基因。 细节如下: 研究首先在pCOLADuet-1质粒上构建了一个由4个酸响应启动子及其下游触发RNA表达框构成的酸触发模块。4个酸响应启动子表达产物为4种针对不同立 足点开关的触发RNA。为了保证立足点开关的表达效果,研究首先对 触发RNA 和 立足点开关 进行了基于红色荧光蛋白的筛选,筛选能在低pH情况下显著 增强下游基因翻译的触发RNA-立足点开关对,并在触发RNA-立足点开关不变的情况下,从酸响应启动子文库中,筛选了不同强度的酸响应启动子。 随后将不同强度的启动子、不同的触发RNA-立足点开关对、不同的耐酸基因合并成耐酸模块文库,耐酸基因因机制差异被分为4个功能组:质子消耗系统 (gadB、gadE、adiC、ybaS 和 rcsB)、蛋白质保护系统的伴侣(hdeB、degP、dps、spy 和 DS-YlHD),细胞膜修饰和氧化还原稳态系统(sthA、 cfa、osmY 和 ...